参考胃肠样本库建立方法

取材方法

1. 评估条件（小于2cm的肿块不建议取材；1.5cm以下的不要采集）

2. 无菌生理盐水冲洗数遍

3. 取前拍照

4. 消毒灭菌物品取材，先正常，后癌旁，后癌灶。

5. 大小：0.5cm*0.5cm*0.5cm,约50-100mg。

6. 避开坏死区域、黏液区。选择距离肿瘤灶2cm左右为癌旁，5cm以上为正常组织。肿瘤取材应当选择肿瘤边缘隆起区域内侧。避开浸润最深处（避免取到肌肉），不可破坏外膜层。

7. 各部位取3管，放-80摄氏度冰箱。应当确保组织样本完全浸泡在液体中。

8. 直肠取材，无论肿瘤位置都应该沿肠系膜对侧切开肠腔，保证肠系膜的完整性。

9. 石蜡包埋的样本大小应至少0.5*0.5*0.2cm大小。

主要要求

1. 取材的质量问题
1. 溃疡型肿块，周边多隆起，在隆起区内侧与隆起区交界的地方取材。
2. 时间的影响：30min以内，缺血对组织的影响较少。
1. 热缺血
2. 冷缺血：30min以内55%结直肠样本RNA完整。45min后，20%结直肠样本RNA完整
3. 结肠组织比结直肠癌组织RIN低，低分化组织比中、高分化组织RIN低。术前新辅助后的样本RIN低。

2. 随机抽查：

3. 每月2%样本质控，每年0.1%样本质控，指标如下
1. DNA（A260/A280）
2. RNA:RIN
3. 蛋白质：磷酸化水平
4. 肿瘤特性：苏木素、伊红染色后确认肿瘤细胞的百分比。大于80%的质量良好。小于65%的为不合格样本。