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文章来源说明
目的细胞的培养
细胞复苏
细胞传代
细胞冻存
目的细胞的密度及药物筛选浓度确定
目的细胞的密度确定
过夜培养后密度达到80%为适宜
药物筛选浓度确定
使用不同浓度的抗生素对细胞进行处理,筛选出5-10天内使得细胞全部死亡的最低抗生素浓度。
抗生素 | 常见作用时间 | 常用浓度范围 |
嘌呤霉素 | 3-10天 | 1-10ug/ml |
G418 | ㅤ | 100ug/ml~1000ug/ml |
潮霉素 | ㅤ | 50ug/ml~1000ug/ml |
慢病毒侵染目的细胞
1.根据公式计算病毒用量:
- 聚凝胺(Polybene)。
3.更换为新鲜培养基之后继续使用含有抗生素的选择培养基筛选10天左右,使得稳定表达的细胞得以保留。
4.通过有限稀释来进行稳转细胞株单克隆的筛选。
致谢:
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